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一起學(xué)習(xí)下緩沖液的配制及其保存方法
更新時(shí)間:2020-04-14
生化實(shí)驗(yàn)室常用的
緩沖液
主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羥甲基氨基甲烷)等系統(tǒng),生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因?yàn)橛袝r(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。
硼酸鹽:硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖。
檸檬酸鹽:檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用。
磷酸鹽:在有些實(shí)驗(yàn),它是酶的抑止劑或甚至是一個(gè)代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來(lái)。而且它在pH7.5以上時(shí)緩沖能力很小。
三羥甲基氨基甲烷:它可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點(diǎn)時(shí)溫度效應(yīng)。這點(diǎn)往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris緩沖液,4℃時(shí)是8.4,37℃時(shí)是7.4,因此,4℃配制的
緩沖液
在37℃進(jìn)行測(cè)量時(shí),其氫離子濃度就增加了10倍。在pH7.5以下,其緩沖能力極為不理想。
緩沖液的配制及其保存:
1.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)保存在干燥的地方,如混合磷酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在空氣濕度較大時(shí)就會(huì)發(fā)生潮解,一旦出現(xiàn)潮解,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)即不可使用。
2.配制標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用二次蒸餾水或者是去離子水。如果是用于0.1級(jí)pH計(jì)測(cè)量,則可以用普通蒸餾水。
3.配制標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)使用較小的燒杯來(lái)稀釋,以減少沾在燒杯壁上的標(biāo)準(zhǔn)液。存放標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的塑料袋或其它容器,除了應(yīng)倒干凈以外,還應(yīng)用蒸餾水多次沖洗,然后將其倒入配制的pH標(biāo)準(zhǔn)溶液中,以保證配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確無(wú)誤。
4.配制好的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液一般可保存2—3個(gè)月,如發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時(shí),不能繼續(xù)使用。
5.堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)裝在聚乙烯瓶中密閉保存。防止二氧化碳進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)溶液后形成碳酸,降低其pH值。
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